作为生命科学的重要分支,动物科学的基本任务是在认识和掌握动物遗传变异、生长发育、免疫学、繁殖消化代谢等生命规律的基础上,为人类提供质优量多的动物产品。而其中的免疫学研究对于贯穿整个动物科学起到了中枢纽带的作用。
谈到免疫学,映入大家脑海中的一定是生物体抵抗各种细菌和病毒的场景,没错,大家的直觉很有道理!其实,免疫学是一门研究生物体对抗原物质免疫应答性及其方法的重要科学,也是各种生物疾病防治的基础。小O同学对此也一直甚有兴趣,恰巧今天有幸跟免疫实验室来一场近距离接触,快来一起看看吧!
趣味源自深奥之免疫实验室
我们要参观的是位于我国东南沿海地区的一所农林高校,这是全国建校早的农林院校之一,也是福建省重点建设3所高水平大学之一,小O同学将带领大家在神秘的动物科学学院开启我们的发现之旅。
在动物科学的免疫学研究中,酶免疫测定(Enzyme Immunoassay,EIA)是一种对液相内微量物质至关重要的测定技术,其分为酶联免疫吸附实验(ELISA)和酶免疫组化技术,前者用于测定可溶性抗原或抗体,后者用于测定组织或细胞表面的抗原。我们要讲的故事将围绕酶联免疫吸附试验(ELISA)展开。
ELISA是酶免疫测定技术中应用广的技术,其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的ELISA法有双抗体夹心法、直接法、间接法等。接下来,实验室的老师将采用检测抗体常用的间接法为你展示精彩的ELISA实验。
首先,抽取鸡的新鲜血液,离心后取上清液,并使用磷酸缓冲盐溶液(PBS)进行1:100的稀释,静置;
接下来,进行包被抗原,即将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原,保持4℃过夜孵育,然后加入5%的脱脂奶粉进行封闭,洗涤三次,除去未结合的抗原及杂质;
第三步,加入待检血清(一抗),保持37℃孵育1小时,之后加入PBS在室温条件下进行5分钟的洗涤,抛干;
第四步,加入酶标抗体(二抗),保持37℃孵育1小时,之后加入PBS在室温条件下进行5分钟的洗涤,抛干;
后,加入底物显色,保持37℃反应30分钟,并加入2 mol的硫酸溶液进行终止。然后就可以用ELISA检测仪测定OD值(光密度),并计算出P/N比值(阳性血清与阴性血清之比)。
实验的主义者——奥豪斯微孔板摇床
在整个ELISA实验过程中,有多个过程需要进行摇荡混匀的操作,首先是样品和试剂的混匀,包括稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以实验的持久性和均一性;其次是洗板洗涤的过程,需要将特异结合于固相的抗原或抗体与反应孵育过程中吸附的非特异成份分离开来,以ELISA测定的特异性。洗板对于整个实验过程也是关键的一步,洗液尽量不要溢出孔外,这就对于摇荡的稳定性有很高的要求。
之前该实验室采用的摇荡混匀方法效果欠佳,尤其是稳定性和可控性不能,经常会出现样品稀释地不均匀,或在洗涤过程中由于设备振动发生洗液溅出孔外的现象,从而造成操作台污染。这对于敏感性和清洁性要求很高的ELISA实验显然是不能接受的。
潜移默化源于亲密接触。一切陈旧糟糕的实验效果自一个身手敏捷的小家伙初次光临实验室的那天起戛然而止,可不要小瞧,它不光极大地提高了环境适应性,更重要的是有效地保障了实验安全性,带来的化学反应都令实验室的工作人员们叹为观止。看到下面这台仪器了吗?没错,我们说的就是它——奥豪斯数显控制轻负载微孔板摇床!
扁平的机身设计占用空间更少,可轻松放入大多数通风橱或培养箱,橡胶吸盘基座提供了更高的耐久性和稳定性。同时,反应灵敏的神经中枢——微处理控制器和功能强大的心脏——三偏心轴平衡驱动的无刷直流电机能够确保一致均匀的摇荡动作可靠运行,并对摇荡过程中任何突发情况进行灵活有效的应变。尤其是缓慢升速设计能将速度缓慢安全地提升至目标设定值,以免微孔板的样品溅出;另外,当系统检测到障碍物或托盘过载时,将发出声光信号警报。整款产品的智能性大大提高了实验的自主权,从而节约了人工辅助操作的成本。
俗话说,工欲善其事,必先利其器。一台性能的实验室设备对顺畅的实验流程可是至关重要。如果您想了解更多摇床系列或奥豪斯其他实验室设备的产品信息,或正在寻求更专业细致的选型指导,请速速联络我们,我们专业的工程师们欢迎随时来骚扰哦!
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